Zawartość

• Główna różnica
• Southern Blotting vs. Western Blotting
• Wykres porównania
• Co to jest Southern Blotting?
• Co to jest Western Blotting?
• Kluczowe różnice
• Wniosek

Główna różnica

Główną różnicą między Southern Blotting a Western Blotting jest to, że Southern Blotting jest techniką stosowaną do wykrywania określonego fragmentu DNA w danej próbce, natomiast Western Blotting służy do znalezienia określonego białka w danej próbce.

Southern Blotting vs. Western Blotting

Blotting to technika stosowana przez naukowców do oddzielania różnych rodzajów cząsteczek od mieszaniny lub próbki. W tej technice makrocząsteczki, takie jak kwasy nukleinowe (DNA i RNA) i białka w mieszaninie, przemieszczają się przez płytkę żelu. Tutaj drobne cząsteczki będą się poruszać szybciej niż większe. Cząsteczki te są dociskane do powierzchni unieruchomionej membrany, która przenosi cząsteczki na membranę. Istnieją różne rodzaje blottingu na podstawie wykrywania określonego materiału, tj. Blotting południowy, blotting północny i blotting zachodni. Southern blotting jest rodzajem blottingu stosowanym do wykrywania DNA, podczas gdy western blottingiem jest wykorzystywany do wyszukiwania białka. Southern blotting został opracowany przez Edwarda M. Southern w 1975 roku. Jest on znany jako Southern blotting. Z drugiej strony, western blotting został opracowany przez grupę George'a Starka na Uniwersytecie Stanforda w 1979 roku. Nazwa ta była używana w połączeniu z Southern blotting. Blotting południowy jest używany do znalezienia określonej sekwencji DNA, natomiast western blotting jest używany do znalezienia określonej sekwencji aminokwasowej lub białkowej.

Wykres porównania

Southern Blotting	Western Blotting
Technika stosowana do znalezienia określonej sekwencji DNA w danej mieszaninie jest znana jako Southern blotting.	Technika stosowana do ustalenia określonej sekwencji aminokwasowej białka w danej mieszaninie jest znana jako Southern blotting.
Opracowany przez
Southern blotting został opracowany przez Edwarda M. Southern w 1975 roku.	Western blotting został opracowany przez grupę George'a Starka na Uniwersytecie Stanforda w 1979 roku.
Rodzaj wykrycia
Metoda Southern blotting służy do znalezienia określonej sekwencji DNA.	Western blotting jest używany do znalezienia określonej sekwencji aminokwasowej lub białkowej.
Zasada
Działa na zasadzie hybrydyzacji.	Działa na zasadzie metody immunodetekcji lub interakcji antygen-przeciwciało.
Sonda
Jako sondę stosuje się jednoniciowy DNA lub czasami RNA.	Pierwotne i wtórne przeciwciała są stosowane jako sonda.
Elektroforeza żelowa
Elektroforeza w żelu agarozowym jest stosowana w analizie Southern.	SDS PAGE / Żel poliakryloamidowy stosowany do rozdzielania białek w western blotting
Procedura kleksowania
Metoda Southern blotting przebiega zgodnie z procedurą transferu kapilar.	Western Blotting postępuje zgodnie z procedurą transferu elektrycznego.
Próba
Podczas Southern blotting próbkę należy zdenaturować.	Podczas analizy western blot próbka powinna znajdować się w stanie natywnym.
Bloking
W blottingu południowym nie ma żadnego kroku, takiego jak blokowanie.	Podczas analizy Western, niespecyficzne miejsca przeciwciał są blokowane na papierze nitrocelulozowym za pomocą mleka w proszku lub albuminy surowicy bydlęcej (BSA).
Metody etykietowania
Typowymi metodami znakowania stosowanymi w Southern blotting są stosowanie barwników chromogennych lub znakowania radioaktywnego lub znakowania fluorescencyjnego itp.	Metody znakowania stosowane w western blotting to stosowanie fluorescencyjnie znakowanego przeciwciała lub znakowania radioaktywnego, barwników chromogennych lub tworzenie diaminobenzydyny itp.
Metody wykrywania
Wykrywanie światła, autoradiograf i zmiany koloru są stosowane jako metody wykrywania w Southern blotting.	Metody wykrywania w western blotting to zmiany koloru i wykrywanie światła itp.
Podanie
Southern blotting stosuje się w wykrywaniu DNA, testach na ojcostwo, palcowaniu DNA, w celu identyfikacji ofiar, w celu identyfikacji przestępców, w celu znalezienia czynników zakaźnych oraz w celu identyfikacji mutacji lub rearanżacji genów itp.	Western blotting służy do znalezienia liczby białek w mieszaninie, do wykrycia obecności wirusa HIV, wirusa i bakterii itp. W surowicy, do znalezienia wadliwych białek i jest stosowany jako konkretny miernik opryszczki, zapalenia wątroby typu B, boreliozy choroba i choroba Creutzfeldta-Jacoba itp.

Co to jest Southern Blotting?

Southern blotting to najstarsza metoda przeprowadzona przez Edwina Southern, nazwana jako Southern blotting. Służy do znalezienia określonej sekwencji DNA w danej próbce lub mieszaninie. W trakcie analizy Southern blot etapy obejmują elektroforezę, przenoszenie i wykrywanie określonych sekwencji. Przede wszystkim DNA ulega fragmentacji za pomocą specyficznego enzymu restrykcyjnego. Następnie pożądane fragmenty DNA są rozdzielane przez elektroforezę żelową. Te fragmenty są denaturowane za pomocą roztworu alkalicznego, np. NaOH itp. W celu oddzielenia dwóch nici DNA. Te jednoniciowe fragmenty DNA są następnie przenoszone na błonę w procesie blottingu. Ten związany z błoną DNA traktuje się następnie znakowaną sondą. Ta sonda przyłączy się do swojej komplementarnej nici na błonie DNA, którą można wizualizować za pomocą autoradiogramu itp.

Co to jest Western Blotting?

Metoda Western blot została wynaleziona przez grupę George'a Starka z Uniwersytetu Stanforda, która jest używana do identyfikacji określonej sekwencji aminokwasów w białku. Jest również znany jako białkowy lub immunologiczny. Etapy podczas western blotting to elektroforeza, przenoszenie i wykrywanie określonych białek. Przede wszystkim ujednorodnij mieszaninę. Następnie rozdziel cząsteczkę będącą przedmiotem zainteresowania za pomocą elektroforezy. Przenieś te cząsteczki na błonę i zidentyfikuj konkretne białko za pomocą specyficznej sondy.

Kluczowe różnice

1. Technika stosowana do ustalania konkretnej sekwencji DNA w danej mieszaninie jest znana jako Southern blotting, natomiast technika stosowana do znajdowania określonej sekwencji aminokwasowej białka w danej mieszaninie jest znana jako Southern blotting.
2. Southern blotting został opracowany przez Edwarda M. Southern w 1975 roku, znany jako Southern blotting. Z drugiej strony, western blotting został opracowany przez grupę George'a Starka na Uniwersytecie Stanforda w 1979 roku.
3. Metoda Southern blotting służy do znalezienia określonej sekwencji DNA. I odwrotnie, western blotting jest stosowany do znalezienia określonej sekwencji aminokwasowej lub białkowej.
4. Southern blotting działa na zasadzie hybrydyzacji po drugiej stronie; Western blotting działa na zasadzie metody immunodetekcji lub interakcji antygen-przeciwciało.
5. Jednoniciowy DNA lub czasami RNA jest używany jako sonda w Southern blotting po drugiej stronie, w western blot pierwszorzędowe i wtórne przeciwciała są stosowane jako sonda.
6. Elektroforezę w żelu agarozowym stosuje się w analizie Southern blotting, podczas gdy SDS PAGE / żel poliakryloamidowy stosuje się do rozdzielania białek w western blotting.
7. Z drugiej strony, Southern blotting następuje po procedurze transferu naczyń włosowatych; western Blotting następuje po procedurze transferu elektrycznego.
8. Podczas Southern blot próbka musi być denaturowana, podczas gdy podczas Western blot próbka powinna znajdować się w swoim naturalnym stanie.
9. Żaden etap, taki jak blokowanie, nie jest zaangażowany w południowy blotting po drugiej stronie, podczas westernu, niespecyficzne miejsca przeciwciał są blokowane na papierze nitrocelulozowym za pomocą mleka w proszku lub albuminy surowicy bydlęcej (BSA).
10. Typowymi metodami znakowania stosowanymi w Southern blotting są stosowanie barwników chromogennych lub znakowania radioaktywnego lub znakowania fluorescencyjnego itp., Natomiast metody znakowania stosowane w western blottingu to stosowanie fluorescencyjnie znakowanych przeciwciał lub znakowania radioaktywnego, barwników chromogennych lub tworzenie diaminobenzydyny itp.
11. Wykrywanie światła, autoradiograf i zmiany koloru są stosowane jako metody wykrywania w południowym bąblu, podczas gdy metody wykrywania w zachodnim bąblu to zmiany koloru i wykrywanie światła itp.
12. Southern blotting stosuje się w wykrywaniu DNA, testach na ojcostwo, palcowaniu DNA, w celu identyfikacji ofiar, w celu identyfikacji przestępców, w celu znalezienia czynników zakaźnych oraz w celu identyfikacji mutacji lub zmiany układu genów, itp. Z drugiej strony, w celu znalezienia liczby białek w mikstura, w celu wykrycia obecności wirusa HIV, wirusa i bakterii itp. w surowicy, w celu wykrycia wadliwych białek i zastosowana jako konkretny środek w przypadku opryszczki, zapalenia wątroby typu B, boreliozy i choroby Creutzfeldta-Jacoba itp.

Wniosek

Powyższa dyskusja podsumowuje, że Southern blotting jest najstarszą techniką blottingową stosowaną do znalezienia określonego segmentu DNA w próbce, podczas gdy western blotting odkryto później i zastosowano do identyfikacji konkretnej sekwencji aminokwasów lub określonego białka.